首先,我们在预备手术的前一晚,需要通知饲养人员对手术动物进行禁食,一来是避免在麻醉苏醒时的食物返流导致动物的异物性肺炎,二是避免因未禁食对动物血液生化指标的干扰(部分实验需要频繁对动物进行采血化验)。在禁食阶段,常规饲养条件下,猪至少需要禁食12小时,才可以尽可能让猪排空肠道,如果是进行腹腔消化道类手术,禁食时间需要延长到24h甚至加服泻药,禁食同时再进行术前2h禁水。
接下来进入动物的镇静诱导阶段,在此连续阶段,不同的实验人员会有自己不同的操作习惯,作者是指对药物的使用习惯。
方案1:噻拉嗪+丙泊酚,这种术前麻醉的方案从成本角度而言是最有性价比的,因为国产噻拉嗪价格便宜,丙泊酚单支量大,平均算下来成本也不高。噻拉嗪肌肉注射(im),丙泊酚静脉注射(iv),因为猪对噻拉嗪不是很敏感,所以在使用药物时的有效剂量其实很难把控,之前笔者自己做过的实验,2ml:100mg每只的国产噻拉嗪,28kg的成年巴马猪,给了3支,药物起效后也仅仅是站立有一些踉跄,甚至都没有完全卧倒。这种方案的使用一般是在肌注噻拉嗪后,猪稍微安静一些,需要稍微进行保定控制,快速扎上耳静脉留置针,静推丙泊酚,达到麻醉目的,上台手术。第一种方案的风险在于噻拉嗪剂量的不确定性,大量给予噻拉嗪可能会导致动物的心肺功能抑制,再加上技术人员对丙泊酚易导致呼吸中枢暂停机制的不明确,如果在术前阶段用时太长,就可能导致动物死亡。
方案2:噻拉嗪+舒泰50,这种方案从操作的角度而言是最方便的,二者按一定比例混合溶解,直接肌肉注射,等完成麻醉,动物失去行动能力再进行留置针安放,紧接着进行后续的备皮、插管、保定等工作。虽然这种方案在前期操作时较为便利,但是在气管插管阶段,有时会出现一些小插曲。在插管前段抵达声门裂时,因为没有药物带来的良好肌松作用,前段无法进入气管,甚至在打开猪的口腔时,感觉到猪的上下颌肌肉仍然有明显的阻力对抗。此时可能就需要加注麻醉药物,带来的风险也会变高。目前也有人用利多卡因喷雾对插管入口处进行局部麻醉,也是有良好效果的。
方案3:舒泰50+丙泊酚,这种麻醉方案是三种方案里成本最高的,但是笔者认为是最稳妥的方案,尤其是从实验动物成本和实验平稳进行的角度而言。舒泰50肌注,按照8-15mg/kg的剂量,如果是小体型猪(巴马猪或中华小黑猪)且正常体型,8-10mg/kg足矣;如果猪体型较大,比如大白、长白猪,剂量则需要拉高到10mg/kg以上,如果需要补注,补注剂量一般为头次剂量的一半且只补一次。舒泰注射后,等待3-5分钟,动物进入诱导阶段,埋置留置针,剃毛。紧接着静脉注射丙泊酚,速度要慢,大概每秒钟0.4ml。在此阶段不同的猪需要的丙泊酚量不一致,最好用一支10ml注射器抽取不低于5ml的丙泊酚预备,缓慢推注的同时尝试掰开猪嘴,出现上下颌分离无阻力时,此时进行气管插管,绝大多数猪的顺应性都很好,插入指定位置后用纱布或编织绳将插管固定并进行套囊充气,连接麻醉机启用呼吸麻醉。
术前的采血大部分也是在镇静诱导完成时进行的,因为猪在清醒状态下几乎没有服从性。猪的静脉采血主要部位有俩处,一处是在猪的耳静脉,一处是在猪的前腔静脉,在进行采血时,都有各自的技巧方便采血。
耳静脉采血时,大猪静脉很好找,操作也简单一些,但是小型猪比如巴马,多数耳朵是黑皮肤,静脉细不明显,此时为了方便采血或埋置留置针,可以先用手指弹耳背,再用酒精纱布反复搓拭耳背皮肤(有人喜欢用碘伏),在酒精和外力的刺激下,耳静脉就会明显很多,也就更方便操作。耳静脉适合少量采血,5ml以下,大猪10ml以下。勒皮筋也是一种技巧,但多数实验室准备间不太会准备这个道具。
前腔静脉采血需要一定的技巧,朝右/左侧胸前凹陷窝最低处进针,进针的方向要朝向对侧的肩胛软骨,刺破前腔静脉后,持握注射器的手会有坠空感,针尖不要来回挪动,如需大量采血更换针筒即可。切忌短时间内重复挑刺该血管,原因是穿刺处的前腔静脉受到刺激会收缩,再次刺入不容易找到血管,另外针头反复在此区域尝试,针尖可能会挑破前腔静脉致使动物死亡。
在诱导、剃毛、采血都完成后,后续就要进行气管插管,由于猪的吻突较长,不同犬一般上下颌开合角度很大,操作空间比较狭小,插管就要难一些,这也是我为什么说到要有一个合适的术前麻醉方案,术前麻醉做不好,后续的操作就都会受到限制。常规插管的选择,巴马猪多数情况用6号插管,成年大白8号插管。当然偶尔会有例外,所以在插管时要根据经验判断预备一个大一号一个小一号,通俗的经验是根据猪的俩鼻孔间距等于气管插管外径这样的方式来快速的判读。因为猪的长吻突,也要用长规格的喉镜,平常犬猫适用的喉镜并不完全通用。在肌松良好的情况下, 不需要辅助导丝,此处有一点容易忽略,尽可能用手牵拉舌头前中段,喉镜舌片前端下压会厌根部来暴露声门,如果必须下压会厌进行暴露,也要尽可能缩短时间,苏醒或术中可能会导致动物会厌水肿呼吸困难。
插管完成连接呼吸麻醉机的同时,进行保定,用猪蹄扣套在前肢系部和后肢跗关节上,拉直四肢固定确实即可。术中体位根据术式要求进行调节。
术中的呼吸麻醉一般使用的药物为异氟烷,开始阶段一般遵循“三三原则”,即3%异氟烷浓度通气3分钟,随后浓度调整至1%,术中根据具体场景进行异氟烷的浓度调节。健康动物在术中呼吸麻醉机的工作方式常规使用压控模式,在手术收尾缝合阶段根据动物情况及时调整到自主呼吸模式。
在苏醒阶段,有时动物会出现苏醒不及时的情况,在动物没有出现自主呼吸和吞咽动作时,不要着急拔去气管插管。苏醒不及时,如果前期使用了噻拉嗪,可以准备好相应的拮抗药,包括氟马西尼;此时也可以采取物理刺激的方式,用针尖针刺猪的鼻尖、趾间、肛门,促进动物的苏醒。
下一期我们将对猪的气管插管进行详情解析。
参考书籍:
-The Laboratory Swine, 2nd Edition
参考链接:
-youtube点com/watch?v=F-68EfwaHgM
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